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提取原则:尽量保持核酸的完整性,即保持天然状态,防止核酸酶对核酸的降解(生物 损伤),也要防止化学因素(酸、碱等)或物理因素(高温、机械剪切等)引起核酸变性或 破坏。 最大限度减少染色体DNA 的污染,去除RNA、可溶性蛋白质杂质。
核酸提取纯化方法 1、 酚/氯仿抽提法 1956年发明,通过酚/氯仿处理细胞破碎液或者组织匀浆后,在水相中主要溶解以DNA为主的核酸成分,在有机相中主要是脂类物质,蛋白质位于两相之间。 2、 醇沉淀法
核酸为两性电解质,相当于多元酸,可以使用中性或偏碱性的缓冲液使核酸解离成阴离子,置于电场中向阳极运动,这就是电泳的原理。 1956年发明,通过酚/氯仿处理细胞破碎液或者组织匀浆后,在水相中主要溶解以DNA为主的核酸成分,在有机相中主要是脂类物质,蛋白质位于两相之间。